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產品中心急性中毒快速檢測類農藥殘留速測光度計通用酶試劑分光光度法通用酶試劑 農藥殘留酶試劑
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更新時間：2017-05-29
廠商性質：生產廠家
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北京中諾泰安科技有限公司
程艷： :
蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘毒快速檢測
酶抑制率法（分光光度法）試劑 使用說明
本試劑為國家標準快速檢驗方法GB/T5009.199-2003的配套試劑。酶活性和對農藥的靈敏度指標均達到或超過了國家標準要求，可以在各種型號的農藥殘毒檢測儀（分光光度法）上使用，具有穩定性好、靈敏度高和使用方便等特點。
一、試劑配制
1. 緩沖液試劑：整包倒入大燒杯中，加1000mL純凈水溶解，酸堿度為pH8.0，常溫保存；
2. 乙酰膽堿酯酶：取一支酶粉加20mL緩沖溶液溶解，4℃冰箱中保存，一周內用完。也可將溶解后的酶液分成幾個小瓶，將其冷凍，用時融化，但不能重復多次冷凍、化解。
3. 顯色劑：取一支顯色劑加入20mL緩沖溶液，避光保存；
4. 底物：取一支底物加20mL緩沖溶液，搖勻后置4℃冰箱中保存；
二、分析步驟
1. 樣品處理：選取有代表性的蔬菜樣品，沖洗掉表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取樣品1g，（非葉菜類取2g）放入燒杯或提取瓶中，加入5mL緩沖溶液，手搖振蕩1～2分鐘，或超聲波振蕩30秒鐘，倒出提取液，靜置3~5min，待用。
2. 對照溶液測試： 先于試管中加入100微升酶液和100微升顯色劑，再加入2.5mL緩沖溶液，搖勻后于37°C放置15min，加入100微升底物搖勻，此時檢液開始顯色反應，應立即放入儀器比色池中，記錄初始吸光度A1和反應3 min時的吸光度A2，A2-A1=DA0。
3.樣品溶液測試：先于試管中加入100微升酶液和100微升顯色劑，再加入2.5mL樣品提取液，其它操作與對照溶液測試相同，記錄初始吸光度A1和反應3 min時的吸光度A2，A2-A1=DAt。
三、結果計算
結果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
抑制率（%）=[ （DA0-DAt）/ DA0]×100
當蔬菜樣品提取液對酶的抑制率≥50%時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農藥存在，樣品為陽性結果。陽性結果的樣品需要重復檢驗2次以上。
對陽性結果的樣品，可用其它方法進一步確定具體農藥品種和含量。
四、注意
1. 每批樣品的控制時間、溫度條件必須與對照溶液的條件**。
2. 蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質，容易產生假陽性。處理這類樣品時，不要剪的太碎。對一些含葉綠素較高的蔬菜，也不要剪的太碎。
3. 當溫度條件低于37°C，酶反應的速度隨之放慢，加入酶液和顯色劑后放置反應的時間應相對延長，延長時間的確定，應以膽堿酯酶對照溶液測試得到的吸光度A2-A1≥ 0.3以上，即可往下操作。當對照溶液酶液的加入量大一些時，也可使A2-A1≥0.3以上。
4. 當吸光度大到無法讀取時，說明測定液渾濁有干擾。
五、產品有關技術指標
1. 代表性農藥的檢出下限見下表
農藥名稱 | 檢出限mg/kg | 標準要求檢出限mg/kg |
甲胺磷 | 0.65 | 2.0 |
氧化樂果 | 0.5 | 0.8 |
敵敵畏 | 0.01 | 0.1 |
呋南丹 | 0.01 | 0.3 |
2. 乙酰膽堿酯酶的活性：（室溫20°C以上進行實驗）DA0≥0.3。
六、包裝及保存條件
每包可做200份樣品，0°C以下冰箱冷凍保質期為三年，配成試劑后保存期為一周
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